細(xì)胞培養(yǎng)板緊密貼合的孔蓋，可有效防止細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中培養(yǎng)基的污染與蒸發(fā)的損耗。

　　細(xì)胞培養(yǎng)板在進(jìn)行細(xì)胞操作時(shí)同樣遵循嚴(yán)格無(wú)菌的原則，各項(xiàng)操作要保證規(guī)范、科學(xué)，不對(duì)細(xì)胞的生長(zhǎng)造成額外的影響。這其中最常見的問(wèn)題就是如何保證加樣后細(xì)胞的均勻和盡量減少換液對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)的影響。

　　24孔培養(yǎng)板或培養(yǎng)皿的蓋子都很松，這樣是方便了透氣，但是細(xì)菌、霉菌等污染物會(huì)不會(huì)也隨著溜進(jìn)去呢？

　　蓋子很松，屬于半開放培養(yǎng)，這樣的目的是透氣（實(shí)際上是為了使培養(yǎng)皿外的CO2能夠與培養(yǎng)皿充分交換，維持培養(yǎng)基的pH值）。

　　凡事有利必有弊，這樣當(dāng)然增加了污染的可能性。此外這樣還會(huì)使培養(yǎng)皿內(nèi)的液體蒸發(fā)，這對(duì)于精確定量的藥物來(lái)說(shuō)就顯得值得注意了。所以以下二條措施是必須的a培養(yǎng)箱內(nèi)空氣必須清潔（定期紫外線照，酒精擦洗，盡量少開關(guān)培養(yǎng)箱）b培養(yǎng)箱內(nèi)的濕度必須始終保持為100%（培養(yǎng)箱內(nèi)放置無(wú)菌蒸餾水的水槽）。

　　就好像培養(yǎng)皿，也是一個(gè)蓋倒扣的容器，也不會(huì)污染。主要是因?yàn)樯w子“L"型邊緣產(chǎn)生氣流負(fù)壓的緣故，灰塵上面才附著有微生物，而氣流攜帶的灰塵是無(wú)法通過(guò)產(chǎn)生負(fù)壓的蓋邊緣的。而透氣作用只是通過(guò)空氣的擴(kuò)散，不會(huì)產(chǎn)生氣流，所以只會(huì)透氣不會(huì)透菌。

　　培養(yǎng)過(guò)細(xì)胞的人都知道，細(xì)胞如何的嬌貴，日復(fù)一日精心地呵護(hù)，一個(gè)不慎就全軍覆沒。細(xì)胞培養(yǎng)，從來(lái)就不是一個(gè)容易的過(guò)程。那么關(guān)于細(xì)胞培養(yǎng)的基本知識(shí)你又了解多少呢？

　　首先，操作前準(zhǔn)備工作：

　　1、玻璃吸管和玻璃培養(yǎng)瓶的消毒：1)高壓蒸汽滅菌15分鐘以上；2)干烤消毒140度2小時(shí)以上；

　　2、無(wú)菌工作臺(tái)先清洗后用75%酒精擦拭干凈，紫外線照射40分鐘以上；各種培養(yǎng)板照射3小時(shí)以上；

　　3、培養(yǎng)基(pH7.2)和血清配制好后要做無(wú)菌試驗(yàn):將血清按10%加入培養(yǎng)基內(nèi)，用無(wú)菌的玻璃離心管或玻璃瓶取培養(yǎng)基5-10ml置培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)2-3天，肉眼見無(wú)渾濁或沉淀等異物。分裝后置-20度保存；

　　4、消化液(pH7.8)或其它加入液，應(yīng)用高壓蒸汽滅菌或一次性無(wú)菌濾器過(guò)濾除菌，分裝成支置-20度保存；

　　5、各種凍存的液體復(fù)溫時(shí)應(yīng)邊搖邊融化，否則有的液體(特別是培養(yǎng)基)容易產(chǎn)生沉淀；

　　6、培養(yǎng)箱應(yīng)先用清水清洗后用75%酒精擦拭一遍(如有紫外線的應(yīng)照射1小時(shí)以上，如有高溫滅菌的應(yīng)按程序來(lái)菌)。至少每月一次；

　　7、進(jìn)入操作時(shí)應(yīng)注意先清洗雙手及手腕，然后用75%酒精擦拭，操作時(shí)注意無(wú)菌臺(tái)內(nèi)空間層次；手及物品不要在暴露的瓶口上方來(lái)往，如果數(shù)量較多，培養(yǎng)瓶應(yīng)放在與酒精燈平行地方便于操作，瓶與瓶之間應(yīng)相隔一定的距離，開瓶(蓋)時(shí)應(yīng)先用75%酒精反復(fù)擦拭或用燈燒，開開后應(yīng)用燈先燒口，然后燒蓋。用完后同樣操作。整個(gè)操作過(guò)程盡量在無(wú)菌臺(tái)靠里面一點(diǎn)。